一、 CRISPR/Cas9技术原理
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最近几年新出现的一种基因组编辑工具,它能够完成RNA导向的DNA识别及编辑。与ZFN和TALEN技术相比,CRISPR/Cas9技术更易于操作,具有更强的可扩展性。CRISPR技术使用一段序列特异性向导RNA分子(sequence-specific guide RNA,sgRNA)引导高度保守的CRISPR相关基因(Crispr- associated gene, Cas gene, Cas9)编码的核酸内切酶,到靶位点处对DNA序列进行特异性的切割,并引入单个或多个碱基的插入或缺失突变,从而完成基因组的编辑。目前,CRISPR/Cas9系统的高效基因组编辑功能已被应用于多种模式生物,包括拟南芥、烟草、水稻等植物、人、小鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫及细菌。
二、CRISPR/Cas9载体构建服务
1 实验技术路线及周期
技术优势
1、Crispr/Cas9基因编辑技术易操作,基因敲除效率高,成本低。
2、本公司有针对不同物种的CRISPR/Cas9载体,可根据客户的实验材料而定。
3、本公司使用ClonExpress?技术,无须中间载体,一步将目的片段和载体无缝连接。
4、针对客户的目的基因,可一次设计2-3个gRNA靶点构建载体,提高基因敲除效率。
2 服务参数
分项内容 |
周期(工作日) |
价格 |
植物CRISPR/Cas9载体 |
10 |
|
3实验结果提交形式
序号 |
名称 |
交付形式 |
1 |
项目报告(含实验数据) |
Word文档电子版 |
2 |
实验过程图片 |
JPG或TIF电子版 |
3 |
阳性质粒测序数据 |
电子版 |
4 |
阳性克隆质粒及菌液 |
菌液≥2 ml 质?!?/span>20 μl |
5 |
载体图谱和注释信息 |
Word文档电子版 |
三、 CRISPR/Cas9载体遗传转化服务
CRISPR/Cas9基因编辑技术能精确的对基因靶点进行切割产生突变,达到沉默基因的目的,这类载体的遗传转化也依托于植物组织培养技术。
1 技术路线和周期

2 服务参数
分项内容 |
周期(工作日) |
价格 |
烟草遗传转化 |
2-3月 |
|
炼苗移栽(可?。?/span> |
15 |
|
检测阳性CAS9植株,靶基因测序扩增 |
14 |
|
3 实验结果交付
序号 |
名称 |
交付形式 |
1 |
项目报告(含实验数据) |
Word文档电子版 |
2 |
实验过程图片 |
JPG或TIF电子版 |
3 |
测序数据 |
电子版 |
4 |
载体说明书 |
PDF文档电子版 |
5 |
转基因烟草瓶苗或移栽苗 |
20-40株 |
6 |
CRISPR/Cas9载体质粒和菌株 |
菌液≥2 ml 质?!?/span>20 μl |